細胞生理生化檢測指標

細胞生理生化檢測指標是評估細胞功能狀態(tài)和病理變化的重要依據(jù)，涵蓋代謝活性、膜完整性、酶活性、氧化應激等多個維度。以下為常見檢測指標及其意義：### 1. **代謝活性檢測**通過MTT、CCK-8或ATP檢測反映細胞能量代謝水平。MTT法基于線粒體脫氫酶將黃色四唑鹽還原為紫色結(jié)晶，間接反映活細胞數(shù)量；CCK-8則利用水溶性四唑鹽生成橙色甲瓚，靈敏度更高。ATP檢測通過熒光素酶系統(tǒng)定量細胞內(nèi)ATP濃度，直接反映能量代謝狀態(tài)。這些指標廣泛應用于藥物毒性測試和細胞增殖分析。### 2. **膜完整性評估**乳酸脫氫酶（LDH）釋放試驗和臺盼藍染色是常用方法。細胞膜受損時，LDH外泄至培養(yǎng)液，通過檢測酶活性可量化損傷程度；臺盼藍因無法穿透完整膜結(jié)構(gòu)，僅死細胞被染色，常用于細胞存活率統(tǒng)計。### 3. **酶活性分析**包括ATP酶、線粒體呼吸鏈復合體（如細胞色素C氧化酶）、Caspase家族蛋白酶等。線粒體酶活性下降提示能量代謝障礙，Caspase-3/7激活是細胞凋亡的關(guān)鍵標志。檢測多采用ELISA、熒光底物法或比色法。### 4. **氧化應激指標**活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）等反映氧化-抗氧化平衡。DCFH-DA探針可熒光標記ROS，TBA法檢測丙二醛（MDA）評估脂質(zhì)過氧化水平。這些指標在神經(jīng)退行性疾病、缺血再灌注損傷研究中尤為重要。### 5. **增殖與凋亡檢測**BrdU/EdU摻入法通過標記新合成DNA檢測增殖，流式細胞術(shù)分析細胞周期分布（PI染色）或凋亡率（Annexin V/PI雙染）。線粒體膜電位（JC-1探針）變化、DNA ladder現(xiàn)象也是凋亡特征。### 6. **信號轉(zhuǎn)導與基因表達**Western blot檢測關(guān)鍵蛋白（如p53、Bcl-2家族）表達及磷酸化狀態(tài)，qPCR或RNA-seq分析基因表達譜，鈣離子熒光探針（如Fluo-4）監(jiān)測胞內(nèi)Ca2?動態(tài)變化。### **臨床應用**在腫瘤藥敏試驗中，聯(lián)合代謝活性和凋亡指標可評估化療藥物療效；心血管研究中，LDH與ROS檢測能揭示心肌缺血損傷機制；免疫學研究則通過細胞因子（IL-6、TNF-α）分泌水平評估免疫細胞功能。這些指標需根據(jù)實驗目的進行組合分析，結(jié)合形態(tài)學觀察（如電鏡）和功能學檢測（如氧消耗率），才能全面解析細胞生理狀態(tài)。標準化操作與設立陰性/陽性對照是確保數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵。