碳 13 同位素比值測(cè)定測(cè)蜂蜜：怎么通過比值判斷是

根據(jù)國(guó)標(biāo) GB/T 18932.12《蜂蜜中碳-4植物糖含量測(cè)定方法 穩(wěn)定碳同位素比率法》，利用碳-13同位素比值（δ13C）判斷蜂蜜是否摻假的核心原理和方法如下：

1. 基本原理：植物光合作用途徑的差異

* C3植物： 大部分蜜源植物（如槐樹、椴樹、油菜、紫云英、柑橘等）屬于C3植物。它們光合作用固定二氧化碳的途徑導(dǎo)致其產(chǎn)物（花蜜、花粉）的碳-13同位素比值較負(fù)，通常范圍在 -22‰ 到 -33‰ 之間（相對(duì)于國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)VPDB）。

* C4植物： 玉米、甘蔗、高粱等屬于C4植物。其光合途徑導(dǎo)致產(chǎn)物（如玉米糖漿、蔗糖）的碳-13同位素比值較正，通常范圍在 -9‰ 到 -19‰ 之間。

* 蜂蜜的本質(zhì)： 純正蜂蜜是蜜蜂采集C3植物的花蜜釀造而成，因此其蜂蜜本身的δ13C值應(yīng)與其蜜源植物的C3特征一致（偏負(fù)）。

* 摻假物質(zhì)： 最常見的廉價(jià)摻假物是來源于C4植物的糖漿（如高果糖玉米糖漿HFCS、蔗糖糖漿）。這些物質(zhì)的δ13C值明顯偏正。

2. 國(guó)標(biāo)GB/T 18932.12的核心檢測(cè)邏輯：內(nèi)部比對(duì)法

該標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵創(chuàng)新和核心判斷依據(jù)不是單獨(dú)看蜂蜜的δ13C值，而是比較蜂蜜本身與其所含的蜂蜜蛋白質(zhì)的δ13C值差異。

* 蜂蜜蛋白質(zhì)的來源： 蜂蜜中天然存在的少量蛋白質(zhì)主要來源于蜜蜂本身（在釀造過程中混入）以及采集的花粉。無論蜜源植物是哪種，蜜蜂和花粉都來源于C3植物（蜜蜂以C3植物的花蜜、花粉為食）。因此，蜂蜜蛋白質(zhì)的δ13C值穩(wěn)定地反映了C3植物的特征（偏負(fù)）。

* 檢測(cè)步驟：

1. 分離與純化： 從蜂蜜樣品中分離并純化出蜂蜜本身（主要成分是糖）和蜂蜜蛋白質(zhì)。

2. δ13C測(cè)定： 使用穩(wěn)定同位素比率質(zhì)譜儀分別測(cè)定：

* 蜂蜜本身的δ13C值 (δ13C?????)

* 蜂蜜蛋白質(zhì)的δ13C值 (δ13C???????)

3. 計(jì)算差值 (Δδ13C)： `Δδ13C = δ13C??????? - δ13C?????`

* 判斷依據(jù)（摻假閾值）：

* 純蜂蜜： 由于蜂蜜糖分和蛋白質(zhì)都來源于C3植物，它們的δ13C值應(yīng)該非常接近。理論上Δδ13C應(yīng)該接近于0?？紤]到自然變異和實(shí)驗(yàn)誤差，國(guó)標(biāo)規(guī)定：如果 Δδ13C ≤ -1.0‰，則判定樣品為未摻入C4植物糖的蜂蜜。

* 摻入C4糖漿的蜂蜜： 當(dāng)摻入C4植物糖漿（如玉米糖漿）時(shí)：

* δ13C????? 會(huì)顯著升高（變得更正，因?yàn)閾饺肓似腃4糖）。

* δ13C??????? 基本保持不變（仍然反映C3特征，偏負(fù)）。

* 因此，`Δδ13C = (較負(fù)的值) - (較正的值) = 一個(gè)更大的負(fù)數(shù)`，即 Δδ13C 會(huì)顯著小于 -1.0‰。

* 結(jié)論： 如果 Δδ13C > -1.0‰（即差值小于-1.0‰，例如 -1.5‰, -2.0‰ 等），則判定該蜂蜜樣品中摻入了C4植物糖。

3. 優(yōu)勢(shì)與注意事項(xiàng)：

* 優(yōu)勢(shì)： 內(nèi)部比對(duì)法有效消除了不同蜜源、不同地區(qū)、不同年份C3植物本身δ13C自然變異帶來的影響，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和糖分處于同一環(huán)境。這大大提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和普適性。

* 特殊蜜源（C4蜜源）： 該方法主要針對(duì)摻入C4糖漿。如果蜂蜜本身來源于少數(shù)C4蜜源植物（如中國(guó)的蕎麥蜜在某些地區(qū)可能表現(xiàn)出C4特征），其蜂蜜和蛋白的δ13C值都會(huì)偏正，Δδ13C可能仍在正常范圍。國(guó)標(biāo)附錄A提供了蕎麥蜜的判定方法（需單獨(dú)測(cè)定純蕎麥蜜蛋白的δ13C作為基準(zhǔn)）。

* C3糖漿摻假： 該方法無法直接檢測(cè)摻入來源于C3植物的糖漿（如甜菜糖漿、大米糖漿、木薯糖漿等），因?yàn)樗鼈兊摩?3C值與真蜂蜜接近。檢測(cè)這類摻假需要其他方法（如SMRI、LC-IRMS等）。

* 應(yīng)用： GB/T 18932.12 是檢測(cè)蜂蜜中是否摻入C4植物糖（主要是玉米和甘蔗來源的糖漿）的權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)方法，廣泛應(yīng)用于市場(chǎng)監(jiān)管、企業(yè)質(zhì)檢和進(jìn)出口檢驗(yàn)。

總結(jié)來說：

通過國(guó)標(biāo) GB/T 18932.12 的碳-13同位素比值測(cè)定法判斷蜂蜜是否摻假（C4糖漿），關(guān)鍵是計(jì)算蜂蜜蛋白質(zhì)δ13C與蜂蜜本身δ13C的差值 (Δδ13C)。若 Δδ13C > -1.0‰，則判定未摻入C4植物糖；若 Δδ13C ≤ -1.0‰，則判定摻入了C4植物糖。 該方法利用蜂蜜內(nèi)部蛋白質(zhì)作為C3基準(zhǔn)，精準(zhǔn)高效地篩查出最常見的玉米糖漿等摻假物。