湖北熒光原位雜交技術(shù)-貝科新肽(推薦商家)

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武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

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物流說(shuō)明 : 貨運(yùn)及物流
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原位雜交技術(shù)的原理是什么？有何用途

原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專(zhuān)一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件：組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。

植物染色體原位雜交是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù)，它可以用來(lái)研究植物基因組的結(jié)構(gòu)和功能。該技術(shù)利用DNA探針與目標(biāo)DNA序列的互補(bǔ)性結(jié)合，通過(guò)熒光或性標(biāo)記來(lái)檢測(cè)目標(biāo)DNA序列在染色體上的位置和數(shù)量。

植物染色體原位雜交技術(shù)的基本原理是將DNA探針標(biāo)記上熒光或性同位素，然后將其與目標(biāo)DNA序列進(jìn)行雜交。在雜交過(guò)程中，探針與目標(biāo)DNA序列互補(bǔ)結(jié)合，形成穩(wěn)定的雙鏈DNA分子。隨后，通過(guò)熒光或性同位素探測(cè)技術(shù)，可以檢測(cè)到目標(biāo)DNA序列在染色體上的位置和數(shù)量。

原位雜交第三天

1） ? ? ? ?用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時(shí)以上，后用1mlMABT溶液置換，熒光原位雜交技術(shù)，25分鐘。

2） ? ? ? ?用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。

3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。

4）每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色

5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。

6）4C冰箱保存。

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