





外泌體的提取方式:
1、離心法:此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足。
2、過濾離心:這種操作簡單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣純度不足。
3、密度梯度離心法:用此種方法分離到的外泌體純度較高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜
4、免1疫磁珠法:這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單,但生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性。
5、色譜法:此種方法分離出的外泌體大小均一,但設(shè)備特殊,應(yīng)用不廣泛。

外泌體上的TNF家族蛋白不能被膜型金屬蛋白酶切割,故較為穩(wěn)定,同時(shí)借助膜形成三聚體,具有很強(qiáng)的誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的活性。而且,人們認(rèn)為外泌體的轉(zhuǎn)運(yùn)TNF家族蛋白,與各種炎1癥疾病和自身免1疫疾病的產(chǎn)生相關(guān)。
例如,從類風(fēng)1濕關(guān)1節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞中釋放出來的外泌體上,聚集高濃度的膜結(jié)合型TNF-α,會(huì)加重類風(fēng)1濕關(guān)1節(jié)炎病情。

外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn), 1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。
所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳1汁中。 有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精1確分子機(jī)制剛剛開始研究。 外泌體被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。

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